IHC-forskning - hva er det, utvidelse av resultater

Immunohistokjemisk studie er en type vevsundersøkelse som bruker visse reagenser. Etter biopsi eller kirurgi blir materialet som er tatt farget for en histologisk undersøkelsesmetode.

Ved immunhistokjemi av brystkreft inneholder reagensene antistoffer merket med visse stoffer. En antistoff-proteinforbindelse som danner en spesifikk reaksjon når den kombineres med andre steder. Som et resultat av denne metoden kan man bedømme tilstedeværelsen av forskjellige stoffer i vevene..

Immunhistokjemi av brystkreft: essensen av metoden

Immunhistokjemiske reaksjoner finner sted i menneskekroppen hver dag, og essensen er basert på antigen-antistoff-interaksjonen. For eksempel i tilfelle sykdom, når virus og bakterier kommer inn i menneskekroppen, dannes det antistoffer i blodet som fanger fremmedstoffer. Vaksinasjon fungerer i henhold til dette prinsippet, når det som svar på de injiserte antigenene blir produsert antistoffer, som i tilfelle sykdom fanger fremmed mikroorganismer..

Det er mulig å oppdage onkologisk sykdom ved bruk av immunhistokjemiske studier, for eksempel i brystkreft. Metoden er basert på introduksjon av serum med antistoffer, som binder seg til tumorfaktorer i kroppen.

Hvorfor brukes immunhistokjemisk studie?

Mange forskere over hele verden har bekreftet tilstedeværelsen av en rekke spesifikke faktorer i svulster som er direkte relatert til prognosen for kreft og responsen på passende behandling..

Disse faktorene inkluderer:

Reseptorer for kvinnelige kjønnshormoner;
Onkologiske prosessaktivitetsmarkører;
Følsomhet for antineoplastiske midler;
Vaskulær tumorvekstfaktor.

Når man gjennomfører en rutinemessig histologisk undersøkelse med mistanke om brystkreft, er det umulig å oppdage slike egenskaper som en svulst kan inneholde, derfor har immunhistokjemi av brystkreft en betydelig fordel i forhold til andre forskningsmetoder..

Hvor utføres den immunhistokjemiske analysen av brystkreft og avkoding av den?

Materialet for forskning er tumorvev, som tas under en biopsi eller under en operasjon. Det skal bemerkes at materialet må tas før du starter behandlingsforløpet, ellers blir resultatet upålitelig.

Det tatt materialet legges i formalin (desinfiserende middel) og sendes til laboratoriet. Der blir den avfettet, og helles deretter med spesiell parafin. Deretter kuttes prøven tynt i plater opp til 1 mikrometer, legges ut på glassglass og farges med reagenser med den nødvendige konsentrasjonen.

Intensiteten av farging av reagenser med tumorceller avhenger av innholdet i reseptorene. Jo mer de er i materialet, jo mer intens vil fargen være. Histologer tolker fargelesultatene i en spesiell skala:

0-1 + betyr fravær av en onkologisk prosess;
2+ betyr gjennomsnittlig HER2-proteinkonsentrasjon i prøven og negativ neoplasma;
3+ indikerer et økt innhold av HER2-protein, og kreftdannelse er positiv.

Du kan få resultater om en til to uker.

I laboratoriet til sykehuset i Yusupov vil erfarne spesialister foreta en kompetent prøvetaking av materialet og gi en dekryptering av høy kvalitet på innhentede data. En kraftig forskningsbase vil gjøre det mulig å bekrefte diagnosen så raskt som mulig og starte behandling basert på immunhistokjemien til svulsten. Den store erfaringen fra legen og sykepleierne garanterer pasienten suksess og effektivitet av behandlingen.

IHC (immunohistokjemi) for brystkreft: normer og avkoding

Onkologiske sykdommer i melkekjertlene blir diagnostisert hos kvinner ganske ofte. Derfor mister ikke diagnostiske tiltak som gjør det mulig å oppdage en farlig svulst relevansen. Immunhistokjemi i brystkreft er designet for å bestemme følsomheten til ondartede celler for spesifikke stoffer. Gjennom forskning blir det undersøkt om behandlingen som er utført er riktig.

IHC - hva er denne forskningen?

Hensikten med studien

IHC for onkologiske patologier i brystkjertlene blir utført for å:

etablere hvilken type sykdom som er mottakelig for viss terapi;
å identifisere metastaser lansert av svulsten, og omfanget av deres spredning;
finne kilden til metastaser;
å etablere stadiet for utvikling av den oppdagede svulsten;
evaluere effektiviteten av terapi;
finne ut spredningshastigheten for metastaser;
å identifisere følsomheten til blodceller for spesifikke medisinske stoffer for å screene ut ineffektive medisiner.

Indikasjoner for IHC

En diagnostisk studie blir brukt for å bestemme tilstanden til enhver del av menneskekroppen. Prosedyren er foreskrevet ikke bare for brystkreft, men også for eventuelle neoplasmer som antagelig er ondartede. Ved hjelp av IHC bestemmes endometriumstilstanden når:

utseendet til metastaser;
patologier i livmoren;
ufruktbarhet;
mislykkede IVF-prosedyrer;
sykdommer i bekkenregionens organer med ulik etiologi;
konstant spontan abort.

Forberedelse til forskning

Før inngrepet:

bør ikke ta hormonelle medisiner (en uke før du tar biomateriale);
bør ikke ta medisiner for å stoppe blodet;
må utføre grundige hygieneprosedyrer.

Studien ble utført på bestemte dager i menstruasjonssyklusen:

på dag 5 - 7 studeres patologiske endringer i endometrium;
på dag 20-24, blir sekretorisk aktivitet og reseptoraktivitet vurdert.

Forskning fremgang

Før inngrepet markerer legen det valgte punktet på pasientens bryst. Også tumorstykker som er kuttet ut under operasjonen kan tas for analyse..

Videre blir det diagnostiske tiltaket utført på følgende måte:

Det innsamlede biomaterialet blir ført til laboratoriet.
Tumorprøver dyppes i en beholder med formalin.
Biomaterialet er avfettet.
Parafinvæske injiseres, noe som gjør det mulig å bestemme strukturen og typen av tumorvev.
Klipp av et stykke svulst 1 mm tykt.
Plassert på laboratorieglass.
Kjemiske reagenser og antistoffer brukes som fargestoffer.
Testresultatene er klare etter to uker.

Ulike markører tas for å oppdage brystkreft. Hvis testen avslører tilstedeværelsen av en betydelig mengde kvinnelige kjønnshormoner i tumorvevet, utvikler svulsten seg aktivt. Det er til og med mulig at metastaser allerede har begynt. Hvis akkumuleringen av hormoner er gjennomsnittlig, multipliserer de ondartede cellene inaktivt. Dette betyr at pasienten med kompetent og rettidig behandling har muligheten til å gjenopprette helse.

Et positivt resultat av hormonbehandling er mulig hvis Ki-67-markøren i en ondartet brystsvulst ikke overstiger 15 - 17%. Neoplasma vokser raskt hvis markøren når 35%. I denne situasjonen utføres kjemoterapi umiddelbart for å hemme mangfoldigheten av ondartede celler. Hvis markøren er høyere enn 85%, er det for sent å utføre behandling, et dødelig utfall er uunngåelig.

Avkoding av resultatene

Med økt ER og PR i tumorvev kan vi si at den ondartede formasjonen vokser under påvirkning av hormoner. Hvis konsentrasjonen av ER og PR ikke går utover normalområdet eller går ubetydelig, kan pasienten håpe på vellykket behandling.

IHC-indikatorene er dekodet i henhold til en spesiell fargeskala, som korrelerer fargene på skalaen med nyanser av biomaterialet.

0 og +1. Proteinkonsentrasjon er normal. Ingen terapi nødvendig.
+2. Proteinkonsentrasjonen er gjennomsnittlig. Det er en ondartet svulst i brystet. Vanligvis gjøres ytterligere undersøkelser for å bekrefte riktig resultat av den første testen. En tilleggsstudie kalt FISH, lar deg finne ut proteininnholdet i hver celle. Hvis HER-2 er normal, vil FISH-testen gi et positivt resultat, hvis forhøyet, så negativt.
+3. Proteinkonsentrasjon er mye høyere enn normalt. Det er definitivt en ondartet neoplasma i brystet.

Hvis testen viste en høy konsentrasjon av protein, er svulsten av en aggressiv type, og vokser raskt.

I følge resultatene fra IHC skilles 4 typer brystkreft ut:

A-luminal - ER reseptorer er positive, protein reseptorer er negative, Ki-67 er under 14%;
B-luminal - ER- og HER-2-reseptorer er negative, Ki-67 er høyere enn 15%;
overuttrykk - ER- og PR-reseptorer er negative, proteinreseptorer er positive;
basallignende - alle reseptorer er negative.

Prediktive markører

De bestemmer den mest sannsynlige oppførselen til neoplasma på testen. Ingen effekt av terapi på forskning. Testen lar deg bestemme svulstens aggressivitet. Prognosen er viktig for valg av de mest passende medisiner og behandlingsprosedyrer.

Diagnostiske markører

IHC er en kompleks test som bruker et stort antall kreftmarkører. Jo flere markører blir sjekket, jo høyere er forskningskostnadene. Testen er effektiv for å bestemme hvilken type kreft, hjelper med å foreskrive optimal terapi.

Hva er immunhistokjemi for brystkreft

Onkologiske prosesser påvist på tidlige eller sene stadier krever detaljert studie. For dette brukes spesifikke metoder, for eksempel immunhistokjemi av brystkreft. Denne unike prosedyren lar deg identifisere nyansene i sykdomsforløpet og bestemme videre terapeutiske taktikker.

Hva er IHC

En nøyaktig og pålitelig diagnostisk metode - immunhistokjemi - avslører de viktigste antigenene fra svulster. Disse stoffene finnes i kreftceller, det vil si i atypiske, skadede ondartede elementer i kroppen. Takket være denne presise metoden er spesialister i stand til å stille en reell, ubestridelig diagnose..

Ved hjelp av en immunhistokjemisk prosedyre kan andre kreftsykdommer utelukkes. Metoden hjelper også til å velge passende behandlingstaktikk: medisiner, strålebehandling, hormoner eller mål..

Immunohistokjemi, eller IHC, har dukket opp nylig, men har allerede klart å revolusjonere feltet diagnostisk medisin. Det antas at bare denne metoden for å studere kreftceller gir 100% resultater..

Hva immunohistokjemi sjekker

Analyseemnet er vev påvirket av svulsten. De undersøkes på laboratorieglass, etter at de tidligere har blitt behandlet med medisinske proteiner. Siden tumorceller er antigener, det vil si fremmed for kroppens kropp, reagerer proteinet på dem. Slik foregår immunresponsen. Proteinet kommer i kontakt med dem og prøver å nøytralisere dem. Ved bruk av IHC er det også mulig å bestemme om tumorceller er mottagelige for kjønnshormoner. Således er IHC-prosedyren en reaksjon av antigener og antistoffer som bestemmer ondartede celler..

Formål med å foreskrive immunhistokjemi

Ved undersøkelse av melkekjertlene brukes immunhistokjemi som en foreløpig diagnostisk metode. Det kan brukes til å bestemme:

presis plassering av svulsten og metastaser;
det første utviklingsstedet for sykdommen;
arten av patologien - en godartet eller ondartet svulst;
hjelpe leger med å foreskrive riktig behandling;
bestemme graden av kreft;
gjenkjenne prosessenes utvikling;
bestemme resistensen til celler mot medisiner, cellegift og strålebehandling.

IHC er en kompleks studie som lar deg studere prosessene ved sykdommen fullt ut og velge et adekvat terapimetode. Det kan også bidra til å identifisere viktige faktorer som svulstgrenser. Immunohistokjemi gjør det mulig å diagnostisere et brudd på et tidligst mulig tidspunkt.

Til tross for at IHC brukes veldig ofte til brystet, brukes denne metoden også til å studere andre vev i kroppen, inkludert endometrium..

Indikasjoner for prosedyren

Hovedindikasjonen for prosedyren er mistanke om onkologiske prosesser i brystkjertelen. De brukes ikke bare til å studere brystet, men også for å diagnostisere livmoren og tilhørende reproduktive organer:

med hyppige spontanaborter;
med mislykket IVF;
med endometrial hyperplasi eller annen livmorsykdom;
med infertilitet;
med ondartede prosesser i livmoren;
med svingninger i progesteron og østrogennivå.

Det er ingen absolutte kontraindikasjoner for IHC. Det eneste avslaget fra studien er mulig hvis leger ikke kan skaffe biomateriale fra pasienten.

Forberedelse og taktikk

Før inngrepet må pasienten slutte å ta hormonelle medisiner - 7 dager før IHC. Du må også nekte å ta medisiner som påvirker viskositeten i blodet. Før du besøker diagnostikeren, må du ta en dusj. For hver pasient blir dagen for diagnosen foreskrevet av legen, og vurderer hennes menstruasjonssyklus individuelt.

Immunohistokjemi utføres i flere stadier. Dette er en minimalt invasiv teknikk der materialet tas for biologisk forskning:

Avskjær en vevsprøve fra brystet, først merking med en svart markør.
Vev føres til laboratoriet ved å plassere det i en beholder med formalin.
På laboratoriet helles sammensetningen med en løsning som avfetter den, helles med parafin og sendes for histologi.
1 mm tykk skive legges på glass og farges med proteinserum for å oppdage antigener.
Dekrypter resultatet og skriv det ned.

Histologi utføres i gjennomsnitt 7 dager, men i noen tilfeller eller hvis laboratoriet er langt fra medisinsk senter, kan det ta lengre tid.

Avkoding av resultatene

Ved avkoding av den immunhistokjemiske analysen av brystkreft, tas sensitiviteten til reseptorene for østrogen, eller ER (EP), så vel som for progesteron eller PR (PR) i betraktning. Prosedyren viser også innholdet av HER-2-protein i biomaterialet, hvis økte nivå fører til deteksjon av karsinom..

Hvis reseptorer for kjønnshormoner finnes i en svulst, kan vi si at det er utsatt for virkningen av PR og ER - det er hormonavhengig. Men bare hvis nivået av disse hormonene i kroppen er på normale eller høye nivåer.

Ved avkoding av resultatene av IHC ved brystkreft brukes også en spesiell skala:

3+ - indikatoren indikerer en høy konsentrasjon av protein, en positiv neoplasma blir oppdaget.
2+ - indikerer en gjennomsnittlig konsentrasjon av proteinceller, noe som indikerer ondartet brystkarsinom. For avklaring brukes FISH-testen, som utvider IHC ved å undersøke hver celle. Hvis HER2 er normal, vil resultatet være positivt, og hvis det øker, negativt.
0-1 + - resultatet indikerer en normal proteinkonsentrasjon.

Positive svulster med høyest poengsum utvikler seg mer aggressivt enn andre.

Videre studeres indikatorene til Ki67-markøren, som normalt ikke overstiger 17%. Hvis nivået når 35%, indikerer dette en rask tumorvekst, noe som betyr at cellegift er nødvendig. Hvis prosentandelen når 85%, vil behandlingen ikke lenger være effektiv - et dødelig utfall kan ikke unngås.

Krefttyper i IHC-studien

Prosedyren for immunhistokjemi oppdager en og fire typer kreft. Tolkning av IHC-studier i brystkreft:

Luminal A kreft. Reseptorene er positive for østrogen, men negative for protein, og Ki76 er opptil 14%.
Luminal B type. Østrogen- og HER2-reseptorer er negative og Ki67 har et forhold på mer enn 15%.
Ebr B2 overdreven. I dette tilfellet vil hormonene være negative, og proteinet vil være positivt..
Basal-aktig. Det er en negativ verdi for hormoner og andre faktorer.

IHC-diagnostikk kan brukes som en prognose eller som en kontrollstudie for å bestemme kvaliteten og effektiviteten av behandlingen. Hvis analysen viser kreft, bytter de til cellegift, hvis verdiene er negative, foreskriv medisiner.

Prosedyren med immunhistokjemi er en teknikk med høy presisjon for å oppdage og studere svulster, med hjelp av det det er mulig å identifisere tilstedeværelse eller fravær av kreft og å bestemme alle elementene i neoplasma. Kostnaden for en immunhistokjemisk studie for brystkreft er ganske høy og kan nå flere titusenvis av rubler. Imidlertid er det den mest effektive av de eksisterende metodene for betegnelse av ondartede prosesser..

Immunhistokjemiske tester

Immunhistokjemisk studie

Immunohistokjemisk studie (IHC) er grunnlaget for moderne morfologisk diagnose av tumorsykdommer, som bestemmer riktigheten av diagnosen, videre prognose og, i noen tilfeller, dannelse av indikasjoner for utnevnelse av målrettet terapi.

Hovedmålet med IHC-studien er å bestemme differensieringen og histogenesen (vevets tilhørighet) av svulsten.

Immunohistokjemisk studie (IHC) er en tilleggsdiagnostisk metode brukt i tillegg til den viktigste histologiske fargingen med hematoksylin og eosin, som gjør det mulig å identifisere og differensiere godartede og ondartede neoplasmer. Ofte krever den endelige diagnosen, i tillegg til et spesifikt morfologisk bilde, avklaring av immunofenotypen eller de biologiske egenskapene til svulsten, som spiller en viktig rolle i prognosen for sykdommen og bestemmelse av indikasjoner for forskrivning av målrettede medisiner. Til dags dato har moderne vitenskap kunnet bevise at det er bestemmelsen av de biologiske egenskapene til svulsten og deteksjonen av genetiske determinanter (de genetiske egenskapene til svulsten) som er nøkkelen til vellykket behandling i onkologi..

Nylig har IHC-analyse blitt mye brukt i diagnostisk praksis hos patologer og har sluttet å være en metode for rent vitenskapelig forskning..

Hovedmålet med IHC-studien er å bestemme differensieringen og histogenesen (vevets tilhørighet) av svulsten.

Hva er histogenese og tumordifferensiering?

1. Histogenese av en svulst er dens vevets opprinnelse. Belysthet av dette faktum er av stor diagnostisk verdi og lar deg velge en rimelig behandling. Faktisk avhenger dens følsomhet for kjemisk behandling eller strålebehandling av opprinnelsen til svulsten..

2. Graden av differensiering viser hvor mye svulstcellen skiller seg fra den normale i struktur og funksjon.

Avhengig av graden av differensiering er cellene i tumorsubstratet:

differensiert, når strukturen til svulsten er så nær strukturen til forløpervevet som mulig;
dårlig differensiert, hvis likhet med det opprinnelige vevet blir slettet;
udifferensiert (anaplasia) - celler som har mistet likhet med normal (original).

Hva er den til?

Histologisk diagnose av svulster;
Bestemmelse av den nosologiske varianten av svulsten;
Evnen til å bestemme den primære svulsten ved metastase;
Bestemmelse av prognosen for en tumorsykdom;
Fastsettelse av mulighetene og indikasjonene for målrettet terapi, etc..

Mulighetene for immunhistokjemisk forskning i moderne praktisk onkologi er som følger:

Når og hvordan gjennomføres IHC-forskning?

Denne testen er foreskrevet hvis det er mistanke om tilstedeværelse av en tumorsykdom. Materiale for forskning tas under operasjoner eller ved biopsi ved bruk av spesielle tang og nåler. Et tynt mikrosnitt er laget av vevet, som deretter behandles med en løsning av spesifikke antistoffer (immunhistokjemiske preparater), som reagerer med tumorproteiner (antigener). De reagerte områdene avgir en glød med varierende intensitet, på grunnlag av hvilken legen trekker konklusjoner. For eksempel tillater tilstedeværelsen av uttrykk for markører som CD15 og CD30 av tumorceller en diagnose av Hodgkins lymfom; CD117 - gastrointestinale stromalsvulster; CD20 - B-celle lymfomer; CD3 - T-cellelymfomer; HMB45, MelanА - melanom, etc..

antistoffer

For IHC-analyse av primære svulster og deres metastaser brukes et bredt spekter av markører - antistoffer (en markør - en indikator på normale biologiske prosesser, patogene prosesser eller farmakologisk respons på en terapeutisk intervensjon, som objektivt kan måles og evalueres). Antistoffer er cytospesifikke, vevsspesifikke, de kan gjenspeile prosessene for celleproliferasjon og antigener assosiert med svulsten, og til slutt kan de være tumormerker riktig, slik som onkofetale antigener, enzymer, proteinprodukter av cellulære onkogener, etc..

Laboratoriet vårt har et omfattende sett av antistoffer som er godkjent for bruk som diagnostiske tester for tumor- og ikke-tumorlesjoner i forskjellige organer og systemer..

Mengden antistoffer som brukes, avhenger av det enkelte tilfelle og den presumptive diagnosen. Et "utvidet panel av antistoffer" er et sett med antigener for forskjellige tumorstrukturer. Det er også et "lite panel" som viser de vanligste svulstene. Valget av et panel med antistoffer kan gjøres på to måter: i trinn, gradvis øke spekteret, eller du kan umiddelbart bruke et bredt panel av reagenser. På den ene siden betydelige besparelser i reagenser og fond med høyere arbeidskraftskostnader og lang ledetid, på den andre siden et stort forbruk av antistoffer, hvorav noen er med på å etablere den endelige diagnosen på kortest mulig tid.

Spesialistene på vårt laboratorium er tilhenger av det faktum at IHC-analyse, som er en tilleggsmetode, bør omfatte både positive resultater av uttrykk for markører som karakteriserer en viss immunofenotype av svulsten, og negative, som gjør det mulig å ekskludere andre hypoteser og redusere volumet av diagnostiske feil til et minimum..

Utvalgte sykdommer og antistoffer som ble brukt for deres diagnose

Brystsvulster

Brystkreft er den vanligste kreften hos kvinner og den nest vanligste årsaken til kreftrelatert død. Tidlig diagnose, rettidig og korrekt behandling kan øke sjansene for bedring betydelig. Tradisjonell immunhistokjemi (IHC) teknikker kan fungere med veldig små vevsprøver. Denne omstendigheten, kombinert med bruk av antistoffer som er spesifikke for antigener fra tumorceller, gjør denne metoden til et effektivt verktøy i hendene på en patomorfolog som er involvert i diagnosen og prognosen for løpet av onkologiske sykdommer..